產(chǎn)品名稱和規(guī)格:
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價(jià)格(元) |
SC-X002-20 | pDC316線性化載體 | 20μl/20T | 880.00 |
產(chǎn)品介紹:
pDC316載體是Admax腺病毒穿梭載體,該載體不帶綠色熒光蛋白基因,和pBHGlox_E1,3Cre骨架載體一起包裝重組腺病毒用。
基因克隆方法應(yīng)用廣泛的有酶切連接克隆和無(wú)縫克隆,酶切連接克隆的載體制備對(duì)于新手來(lái)說(shuō)比較麻煩,需要準(zhǔn)備載體以及PCR產(chǎn)物還需要進(jìn)行酶切和回收等多個(gè)步驟。無(wú)縫克隆只要準(zhǔn)備好載體,PCR產(chǎn)物回收后可以直接用于連接,大大縮短試驗(yàn)時(shí)間。
使用方法:
1、本產(chǎn)品是將pDC316載體用EcoRI和HindIII雙酶切后,回收的線性化載體。
2、無(wú)縫克隆引物設(shè)計(jì)方法,當(dāng)做克隆載體使用,可以在擴(kuò)增PCR產(chǎn)物的:
(1)上游引物5’端添加序列:ACCACCGTAGAACGCAGATCGAATTCCACCATG。(其中劃線部分為載體上的序列,CCACCATG為KOZAK序列,ATG為翻譯起始位置,注意不要移碼。)
(2)下游引物5’端添加序列:TGCTCGAAGTCGACGAGCTCAAGCTTCA。(其中劃線部分為載體上的反向序列,TCA為終止密碼子)。
3、測(cè)序引物
(1)上游引物pDC316F:ACGTGGGTATAAGAGGCG
(2)下游引物M13R:CAGGAAACAGCTATGAC