產(chǎn)品名稱和規(guī)格:
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價格(元) |
SC-X001-20 | pDC316-mCMV-EGFP線性化載體 | 20μl/20T | 880.00 |
產(chǎn)品介紹:
pDC316-mCMV-EGFP載體是Admax腺病毒穿梭載體,該載體帶綠色熒光蛋白基因,和pBHGlox_E1,3Cre骨架載體一起包裝重組腺病毒用。
基因克隆方法應(yīng)用廣泛的有酶切連接克隆和無縫克隆,酶切連接克隆的載體制備對于新手來說比較麻煩,需要準(zhǔn)備載體以及PCR產(chǎn)物還需要進(jìn)行酶切和回收等多個步驟。無縫克隆只要準(zhǔn)備好載體,PCR產(chǎn)物回收后可以直接用于連接,大大縮短試驗時間。
使用方法:
1、本產(chǎn)品是將pDC316-mCMV-EGFP載體用NheI和HindIII雙酶切后,回收的線性化載體。
2、無縫克隆引物設(shè)計方法,當(dāng)做克隆載體使用,可以在擴(kuò)增PCR產(chǎn)物的:
(1)上游引物5’端添加序列:CTATAGGGAGACCCAAGCTGGCTAGCCACCATG。(其中劃線部分為載體上的序列,CCACCATG為KOZAK序列,ATG為翻譯起始位置,注意不要移碼。)
(2)下游引物5’端添加序列:CTGATCAGCGGTTTAAACTTAAGCTTCA。(其中劃線部分為載體上的反向序列,TCA為終止密碼子)。
3、測序引物
(1)上游引物T7:TAATACGACTCACTATAGG
(2)下游引物BGH:TAGAAGGCACAGTCGAGG