貨號:A102-5
規(guī)格:250rxn/40μl;500rxn/20μl(1.0 ml×5支)
保存:-20℃避光保存兩年
【產(chǎn)品概述】
本產(chǎn)品主要成份是通過基因工程技術改造的DNA聚合酶,核心組分包含Taq酶、dNTPs、Mg2+、PCR反應緩沖液和PCR反應穩(wěn)定劑等,可以有效抑制非特異性擴增,顯著提高擴增效率,從而對靶基因進行快速和準確擴增。本產(chǎn)品為2×預混試劑,使用時只需加入模板、引物和水,使其工作濃度為1×,即可進行反應。具有快速簡便、靈敏度高、特異性強、穩(wěn)定性好等優(yōu)點,可最大限度的減少人為誤差。-20℃保存時,有時會形成沉淀,溶解后混勻不會影響使用效果。
【適用范圍】
適用于常規(guī)PCR快速擴增檢測(可以直接用菌液做模板進行PCR反應),PCR產(chǎn)物3’末端突出一個堿基A,純化后的PCR產(chǎn)物可用于T/A克隆。建議擴增產(chǎn)物片段長度≤4kb。
【推薦qPCR體系(以40 μl反應體系為例)】
Component | Volume | Final ?Concentration |
2×Taq Advanced PCR Master Mix | 20 μl | 1× |
10 μM Forward Primer | 1 μl | 0.25 μM |
10 μM Reverse Primer | 1 μl | 0.25 μM |
PCR-grade Water | Variable | – |
Template | Variable | As Required |
Total Volume | 40 μl | – |
可根據(jù)以下原則進行調整反應體系:反應體系中引物終濃度為0.25μM即可得到較好的擴增效果。當反應性能較差時,引物終濃度可以在0.1-0.5 μM范圍內進行調整。PCR靈敏度極高,推薦將模板稀釋后加入反應體系中,如模板為未稀釋質粒原液,使用體積不應超過qPCR反應總體積的1/20。
【PCR反應條件】
Step | Temperature | Duration | Cycles |
Enzyme activation | 94℃ | 3 min | 1 |
Initial Denaturation | 94℃ | 3 min | 1 |
Denaturation | 94℃ | 30 sec | 40 |
Annealing | 50℃ | 40 sec | |
Extension | 72℃ | 40 sec/kb | |
Extension | 72℃ | 5 min | 1 |
結果檢測:PCR反應結束后,取5μl反應產(chǎn)物,直接上樣進行瓊脂糖凝膠電泳。
【備注】
本產(chǎn)品僅供科研使用。在確認產(chǎn)品質量出現(xiàn)問題時,本公司承諾為客戶免費更換等量的合格產(chǎn)品。 在所有情況下,本公司對此產(chǎn)品所承擔的責任,僅限于此產(chǎn)品的價值本身。