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pPIC3.5 載體信息

  • 產(chǎn)品貨號GS-1341
  • 銷售價格¥ 680
  • 包裝規(guī)格2μg質(zhì)?;?.5ml甘油菌
  • 表達(dá)類型
  • 載體抗性Ampicillin (氨芐青霉素)
  • 篩選標(biāo)記HIS4
  • 載體大小7751 bp
  • 啟動子AOX1
  • 5'測序引物5? AOX1:5?-GACTGGTTCCAATTGACAAGC-3?
  • 備注說明插入基因是必需包含起始密碼子ATG。

pPIC3.5 載體說明

pPIC3.5酵母表達(dá)載體詳細(xì)信息如下:

  1. 載體大小為7,751 bp,是非融合蛋白表達(dá)載體。
  2. 單一限制性內(nèi)切酶位點有BamH I, SnaB I, EcoR I, Avr II 和Not I.
  3. 胞內(nèi)基因表達(dá)載體,不是分泌性蛋白表達(dá)載體。
  4. 載體構(gòu)建時,需要包含一個ATG啟動子,同時需要加入Kozak序列。 (Cavener and Stuart, 1991; Kozak, 1987; Kozak, 1990)
  5. 畢赤酵母中使用HIS4基因篩選。
  6. 將基因插入GS115和KM71的AOX1中,需要使用Sac I線性化質(zhì)粒(GS115產(chǎn)生的基因型為His+ Mut+,KM71酵母產(chǎn)生的基因型為His+ MutS)。
  7. 將基因插入GS115和KM71的HIS4中,需要使用Sal I或 Stu I線性化質(zhì)粒(GS115產(chǎn)生的基因型為His+ Mut+,KM71酵母產(chǎn)生的基因型為His+ MutS)。
  8. 將基因插入GS115的AOX1基因中,也可以使用Bgl II 限制酶線性化質(zhì)粒,產(chǎn)生的酵母基因型為His+ MutS。

pPIC3.5 載體圖譜

  • pPIC3.5質(zhì)粒圖譜/載體圖譜

pPIC3.5 載體序列

0001 AGATCTAACA TCCAAAGACG AAAGGTTGAA TGAAACCTTT TTGCCATCCG ACATCCACAG 
0061 GTCCATTCTC ACACATAAGT GCCAAACGCA ACAGGAGGGG ATACACTAGC AGCAGACCGT 
0121 TGCAAACGCA GGACCTCCAC TCCTCTTCTC CTCAACACCC ACTTTTGCCA TCGAAAAACC 
0181 AGCCCAGTTA TTGGGCTTGA TTGGAGCTCG CTCATTCCAA TTCCTTCTAT TAGGCTACTA 
0241 ACACCATGAC TTTATTAGCC TGTCTATCCT GGCCCCCCTG GCGAGGTTCA TGTTTGTTTA 
0301 TTTCCGAATG CAACAAGCTC CGCATTACAC CCGAACATCA CTCCAGATGA GGGCTTTCTG 
0361 AGTGTGGGGT CAAATAGTTT CATGTTCCCC AAATGGCCCA AAACTGACAG TTTAAACGCT 
0421 GTCTTGGAAC CTAATATGAC AAAAGCGTGA TCTCATCCAA GATGAACTAA GTTTGGTTCG 
0481 TTGAAATGCT AACGGCCAGT TGGTCAAAAA GAAACTTCCA AAAGTCGCCA TACCGTTTGT 
0541 CTTGTTTGGT ATTGATTGAC GAATGCTCAA AAATAATCTC ATTAATGCTT AGCGCAGTCT 
0601 CTCTATCGCT TCTGAACCCC GGTGCACCTG TGCCGAAACG CAAATGGGGA AACACCCGCT 
0661 TTTTGGATGA TTATGCATTG TCTCCACATT GTATGCTTCC AAGATTCTGG TGGGAATACT 
0721 GCTGATAGCC TAACGTTCAT GATCAAAATT TAACTGTTCT AACCCCTACT TGACAGCAAT 
0781 ATATAAACAG AAGGAAGCTG CCCTGTCTTA AACCTTTTTT TTTATCATCA TTATTAGCTT 
0841 ACTTTCATAA TTGCGACTGG TTCCAATTGA CAAGCTTTTG ATTTTAACGA CTTTTAACGA 
0901 CAACTTGAGA AGATCAAAAA ACAACTAATT ATTCGAAGGA TCCTACGTAG AATTCCCTAG 
0961 GGCGGCCGCG AATTAATTCG CCTTAGACAT GACTGTTCCT CAGTTCAAGT TGGGCACTTA 
1021 CGAGAAGACC GGTCTTGCTA GATTCTAATC AAGAGGATGT CAGAATGCCA TTTGCCTGAG 
1081 AGATGCAGGC TTCATTTTTG ATACTTTTTT ATTTGTAACC TATATAGTAT AGGATTTTTT 
1141 TTGTCATTTT GTTTCTTCTC GTACGAGCTT GCTCCTGATC AGCCTATCTC GCAGCTGATG 
1201 AATATCTTGT GGTAGGGGTT TGGGAAAATC ATTCGAGTTT GATGTTTTTC TTGGTATTTC 
1261 CCACTCCTCT TCAGAGTACA GAAGATTAAG TGAGAAGTTC GTTTGTGCAA GCTTATCGAT 
1321 AAGCTTTAAT GCGGTAGTTT ATCACAGTTA AATTGCTAAC GCAGTCAGGC ACCGTGTATG 
1381 AAATCTAACA ATGCGCTCAT CGTCATCCTC GGCACCGTCA CCCTGGATGC TGTAGGCATA 
1441 GGCTTGGTTA TGCCGGTACT GCCGGGCCTC TTGCGGGATA TCGTCCATTC CGACAGCATC 
1501 GCCAGTCACT ATGGCGTGCT GCTAGCGCTA TATGCGTTGA TGCAATTTCT ATGCGCACCC 
1561 GTTCTCGGAG CACTGTCCGA CCGCTTTGGC CGCCGCCCAG TCCTGCTCGC TTCGCTACTT 
1621 GGAGCCACTA TCGACTACGC GATCATGGCG ACCACACCCG TCCTGTGGAT CTATCGAATC 
1681 TAAATGTAAG TTAAAATCTC TAAATAATTA AATAAGTCCC AGTTTCTCCA TACGAACCTT 
1741 AACAGCATTG CGGTGAGCAT CTAGACCTTC AACAGCAGCC AGATCCATCA CTGCTTGGCC 
1801 AATATGTTTC AGTCCCTCAG GAGTTACGTC TTGTGAAGTG ATGAACTTCT GGAAGGTTGC 
1861 AGTGTTAACT CCGCTGTATT GACGGGCATA TCCGTACGTT GGCAAAGTGT GGTTGGTACC 
1921 GGAGGAGTAA TCTCCACAAC TCTCTGGAGA GTAGGCACCA ACAAACACAG ATCCAGCGTG 
1981 TTGTACTTGA TCAACATAAG AAGAAGCATT CTCGATTTGC AGGATCAAGT GTTCAGGAGC 
2041 GTACTGATTG GACATTTCCA AAGCCTGCTC GTAGGTTGCA ACCGATAGGG TTGTAGAGTG 
2101 TGCAATACAC TTGCGTACAA TTTCAACCCT TGGCAACTGC ACAGCTTGGT TGTGAACAGC 
2161 ATCTTCAATT CTGGCAAGCT CCTTGTCTGT CATATCGACA GCCAACAGAA TCACCTGGGA 
2221 ATCAATACCA TGTTCAGCTT GAGACAGAAG GTCTGAGGCA ACGAAATCTG GATCAGCGTA 
2281 TTTATCAGCA ATAACTAGAA CTTCAGAAGG CCCAGCAGGC ATGTCAATAC TACACAGGGC 
2341 TGATGTGTCA TTTTGAACCA TCATCTTGGC AGCAGTAACG AACTGGTTTC CTGGACCAAA 
2401 TATTTTGTCA CACTTAGGAA CAGTTTCTGT TCCGTAAGCC ATAGCAGCTA CTGCCTGGGC 
2461 GCCTCCTGCT AGCACGATAC ACTTAGCACC AACCTTGTGG GCAACGTAGA TGACTTCTGG 
2521 GGTAAGGGTA CCATCCTTCT TAGGTGGAGA TGCAAAAACA ATTTCTTTGC AACCAGCAAC 
2581 TTTGGCAGGA ACACCCAGCA TCAGGGAAGT GGAAGGCAGA ATTGCGGTTC CACCAGGAAT 
2641 ATAGAGGCCA ACTTTCTCAA TAGGTCTTGC AAAACGAGAG CAGACTACAC CAGGGCAAGT 
2701 CTCAACTTGC AACGTCTCCG TTAGTTGAGC TTCATGGAAT TTCCTGACGT TATCTATAGA 
2761 GAGATCAATG GCTCTCTTAA CGTTATCTGG CAATTGCATA AGTTCCTCTG GGAAAGGAGC 
2821 TTCTAACACA GGTGTCTTCA AAGCGACTCC ATCAAACTTG GCAGTTAGTT CTAAAAGGGC 
2881 TTTGTCACCA TTTTGACGAA CATTGTCGAC AATTGGTTTG ACTAATTCCA TAATCTGTTC 
2941 CGTTTTCTGG ATAGGACGAC GAAGGGCATC TTCAATTTCT TGTGAGGAGG CCTTAGAAAC 
3001 GTCAATTTTG CACAATTCAA TACGACCTTC AGAAGGGACT TCTTTAGGTT TGGATTCTTC 
3061 TTTAGGTTGT TCCTTGGTGT ATCCTGGCTT GGCATCTCCT TTCCTTCTAG TGACCTTTAG 
3121 GGACTTCATA TCCAGGTTTC TCTCCACCTC GTCCAACGTC ACACCGTACT TGGCACATCT 
3181 AACTAATGCA AAATAAAATA AGTCAGCACA TTCCCAGGCT ATATCTTCCT TGGATTTAGC 
3241 TTCTGCAAGT TCATCAGCTT CCTCCCTAAT TTTAGCGTTC AACAAAACTT CGTCGTCAAA 
3301 TAACCGTTTG GTATAAGAAC CTTCTGGAGC ATTGCTCTTA CGATCCCACA AGGTGGCTTC 
3361 CATGGCTCTA AGACCCTTTG ATTGGCCAAA ACAGGAAGTG CGTTCCAAGT GACAGAAACC 
3421 AACACCTGTT TGTTCAACCA CAAATTTCAA GCAGTCTCCA TCACAATCCA ATTCGATACC 
3481 CAGCAACTTT TGAGTTGCTC CAGATGTAGC ACCTTTATAC CACAAACCGT GACGACGAGA 
3541 TTGGTAGACT CCAGTTTGTG TCCTTATAGC CTCCGGAATA GACTTTTTGG ACGAGTACAC 
3601 CAGGCCCAAC GAGTAATTAG AAGAGTCAGC CACCAAAGTA GTGAATAGAC CATCGGGGCG 
3661 GTCAGTAGTC AAAGACGCCA ACAAAATTTC ACTGACAGGG AACTTTTTGA CATCTTCAGA 
3721 AAGTTCGTAT TCAGTAGTCA ATTGCCGAGC ATCAATAATG GGGATTATAC CAGAAGCAAC 
3781 AGTGGAAGTC ACATCTACCA ACTTTGCGGT CTCAGAAAAA GCATAAACAG TTCTACTACC 
3841 GCCATTAGTG AAACTTTTCA AATCGCCCAG TGGAGAAGAA AAAGGCACAG CGATACTAGC 
3901 ATTAGCGGGC AAGGATGCAA CTTTATCAAC CAGGGTCCTA TAGATAACCC TAGCGCCTGG 
3961 GATCATCCTT TGGACAACTC TTTCTGCCAA ATCTAGGTCC AAAATCACTT CATTGATACC 
4021 ATTATTGTAC AACTTGAGCA AGTTGTCGAT CAGCTCCTCA AATTGGTCCT CTGTAACGGA 
4081 TGACTCAACT TGCACATTAA CTTGAAGCTC AGTCGATTGA GTGAACTTGA TCAGGTTGTG 
4141 CAGCTGGTCA GCAGCATAGG GAAACACGGC TTTTCCTACC AAACTCAAGG AATTATCAAA 
4201 CTCTGCAACA CTTGCGTATG CAGGTAGCAA GGGAAATGTC ATACTTGAAG TCGGACAGTG 
4261 AGTGTAGTCT TGAGAAATTC TGAAGCCGTA TTTTTATTAT CAGTGAGTCA GTCATCAGGA 
4321 GATCCTCTAC GCCGGACGCA TCGTGGCCGG CATCACCGGC GCCACAGGTG CGGTTGCTGG 
4381 CGCCTATATC GCCGACATCA CCGATGGGGA AGATCGGGCT CGCCACTTCG GGCTCATGAG 
4441 CGCTTGTTTC GGCGTGGGTA TGGTGGCAGG CCCCGTGGCC GGGGGACTGT TGGGCGCCAT 
4501 CTCCTTGCAT GCACCATTCC TTGCGGCGGC GGTGCTCAAC GGCCTCAACC TACTACTGGG 
4561 CTGCTTCCTA ATGCAGGAGT CGCATAAGGG AGAGCGTCGA GTATCTATGA TTGGAAGTAT 
4621 GGGAATGGTG ATACCCGCAT TCTTCAGTGT CTTGAGGTCT CCTATCAGAT TATGCCCAAC 
4681 TAAAGCAACC GGAGGAGGAG ATTTCATGGT AAATTTCTCT GACTTTTGGT CATCAGTAGA 
4741 CTCGAACTGT GAGACTATCT CGGTTATGAC AGCAGAAATG TCCTTCTTGG AGACAGTAAA 
4801 TGAAGTCCCA CCAATAAAGA AATCCTTGTT ATCAGGAACA AACTTCTTGT TTCGAACTTT 
4861 TTCGGTGCCT TGAACTATAA AATGTAGAGT GGATATGTCG GGTAGGAATG GAGCGGGCAA 
4921 ATGCTTACCT TCTGGACCTT CAAGAGGTAT GTAGGGTTTG TAGATACTGA TGCCAACTTC 
4981 AGTGACAACG TTGCTATTTC GTTCAAACCA TTCCGAATCC AGAGAAATCA AAGTTGTTTG 
5041 TCTACTATTG ATCCAAGCCA GTGCGGTCTT GAAACTGACA ATAGTGTGCT CGTGTTTTGA 
5101 GGTCATCTTT GTATGAATAA ATCTAGTCTT TGATCTAAAT AATCTTGACG AGCCAAGGCG 
5161 ATAAATACCC AAATCTAAAA CTCTTTTAAA ACGTTAAAAG GACAAGTATG TCTGCCTGTA 
5221 TTAAACCCCA AATCAGCTCG TAGTCTGATC CTCATCAACT TGAGGGGCAC TATCTTGTTT 
5281 TAGAGAAATT TGCGGAGATG CGATATCGAG AAAAAGGTAC GCTGATTTTA AACGTGAAAT 
5341 TTATCTCAAG ATCTCTGCCT CGCGCGTTTC GGTGATGACG GTGAAAACCT CTGACACATG 
5401 CAGCTCCCGG AGACGGTCAC AGCTTGTCTG TAAGCGGATG CCGGGAGCAG ACAAGCCCGT 
5461 CAGGGCGCGT CAGCGGGTGT TGGCGGGTGT CGGGGCGCAG CCATGACCCA GTCACGTAGC 
5521 GATAGCGGAG TGTATACTGG CTTAACTATG CGGCATCAGA GCAGATTGTA CTGAGAGTGC 
5581 ACCATATGCG GTGTGAAATA CCGCACAGAT GCGTAAGGAG AAAATACCGC ATCAGGCGCT 
5641 CTTCCGCTTC CTCGCTCACT GACTCGCTGC GCTCGGTCGT TCGGCTGCGG CGAGCGGTAT 
5701 CAGCTCACTC AAAGGCGGTA ATACGGTTAT CCACAGAATC AGGGGATAAC GCAGGAAAGA 
5761 ACATGTGAGC AAAAGGCCAG CAAAAGGCCA GGAACCGTAA AAAGGCCGCG TTGCTGGCGT 
5821 TTTTCCATAG GCTCCGCCCC CCTGACGAGC ATCACAAAAA TCGACGCTCA AGTCAGAGGT 
5881 GGCGAAACCC GACAGGACTA TAAAGATACC AGGCGTTTCC CCCTGGAAGC TCCCTCGTGC 
5941 GCTCTCCTGT TCCGACCCTG CCGCTTACCG GATACCTGTC CGCCTTTCTC CCTTCGGGAA 
6001 GCGTGGCGCT TTCTCAATGC TCACGCTGTA GGTATCTCAG TTCGGTGTAG GTCGTTCGCT 
6061 CCAAGCTGGG CTGTGTGCAC GAACCCCCCG TTCAGCCCGA CCGCTGCGCC TTATCCGGTA 
6121 ACTATCGTCT TGAGTCCAAC CCGGTAAGAC ACGACTTATC GCCACTGGCA GCAGCCACTG 
6181 GTAACAGGAT TAGCAGAGCG AGGTATGTAG GCGGTGCTAC AGAGTTCTTG AAGTGGTGGC 
6241 CTAACTACGG CTACACTAGA AGGACAGTAT TTGGTATCTG CGCTCTGCTG AAGCCAGTTA 
6301 CCTTCGGAAA AAGAGTTGGT AGCTCTTGAT CCGGCAAACA AACCACCGCT GGTAGCGGTG 
6361 GTTTTTTTGT TTGCAAGCAG CAGATTACGC GCAGAAAAAA AGGATCTCAA GAAGATCCTT 
6421 TGATCTTTTC TACGGGGTCT GACGCTCAGT GGAACGAAAA CTCACGTTAA GGGATTTTGG 
6481 TCATGAGATT ATCAAAAAGG ATCTTCACCT AGATCCTTTT AAATTAAAAA TGAAGTTTTA 
6541 AATCAATCTA AAGTATATAT GAGTAAACTT GGTCTGACAG TTACCAATGC TTAATCAGTG 
6601 AGGCACCTAT CTCAGCGATC TGTCTATTTC GTTCATCCAT AGTTGCCTGA CTCCCCGTCG 
6661 TGTAGATAAC TACGATACGG GAGGGCTTAC CATCTGGCCC CAGTGCTGCA ATGATACCGC 
6721 GAGACCCACG CTCACCGGCT CCAGATTTAT CAGCAATAAA CCAGCCAGCC GGAAGGGCCG 
6781 AGCGCAGAAG TGGTCCTGCA ACTTTATCCG CCTCCATCCA GTCTATTAAT TGTTGCCGGG 
6841 AAGCTAGAGT AAGTAGTTCG CCAGTTAATA GTTTGCGCAA CGTTGTTGCC ATTGCTGCAG 
6901 GCATCGTGGT GTCACGCTCG TCGTTTGGTA TGGCTTCATT CAGCTCCGGT TCCCAACGAT 
6961 CAAGGCGAGT TACATGATCC CCCATGTTGT GCAAAAAAGC GGTTAGCTCC TTCGGTCCTC 
7021 CGATCGTTGT CAGAAGTAAG TTGGCCGCAG TGTTATCACT CATGGTTATG GCAGCACTGC 
7081 ATAATTCTCT TACTGTCATG CCATCCGTAA GATGCTTTTC TGTGACTGGT GAGTACTCAA 
7141 CCAAGTCATT CTGAGAATAG TGTATGCGGC GACCGAGTTG CTCTTGCCCG GCGTCAACAC 
7201 GGGATAATAC CGCGCCACAT AGCAGAACTT TAAAAGTGCT CATCATTGGA AAACGTTCTT 
7261 CGGGGCGAAA ACTCTCAAGG ATCTTACCGC TGTTGAGATC CAGTTCGATG TAACCCACTC 
7321 GTGCACCCAA CTGATCTTCA GCATCTTTTA CTTTCACCAG CGTTTCTGGG TGAGCAAAAA 
7381 CAGGAAGGCA AAATGCCGCA AAAAAGGGAA TAAGGGCGAC ACGGAAATGT TGAATACTCA 
7441 TACTCTTCCT TTTTCAATAT TATTGAAGCA TTTATCAGGG TTATTGTCTC ATGAGCGGAT 
7501 ACATATTTGA ATGTATTTAG AAAAATAAAC AAATAGGGGT TCCGCGCACA TTTCCCCGAA 
7561 AAGTGCCACC TGACGTCTAA GAAACCATTA TTATCATGAC ATTAACCTAT AAAAATAGGC 
7621 GTATCACGAG GCCCTTTCGT CTTCAAGAAT TAATTCTCAT GTTTGACAGC TTATCATCGA 
7681 TAAGCTGACT CATGTTGGTA TTGTGAAATA GACGCAGATC GGGAACACTG AAAAATAACA 
7741 GTTATTATTC G