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Sure 菌株信息

  • 產(chǎn)品貨號(hào)DC-E072
  • 銷(xiāo)售價(jià)格¥ 680.00
  • 菌株類(lèi)型E.coli
  • 菌株用途克隆菌株
  • 出品公司Stratagene
  • 包裝規(guī)格0.5ml
  • 發(fā)貨周期現(xiàn)貨
  • 培養(yǎng)基LB培養(yǎng)基
  • 培養(yǎng)條件37 ℃,? 有氧
  • 誘導(dǎo)方法
  • 轉(zhuǎn)化方法42 ℃熱激
  • 基因型基因型
  • 菌株抗性卡那,四環(huán)素
  • 菌株別名Sure感受態(tài)細(xì)胞

Sure 菌株說(shuō)明

SURE(Stop Unwanted Rearrangement Events)感受態(tài)細(xì)胞是設(shè)計(jì)用來(lái)克隆在傳統(tǒng)菌株中無(wú)法克隆的DNA片段序列的菌株。SURE感受態(tài)菌株缺乏催化重組和刪除非標(biāo)準(zhǔn)二級(jí)結(jié)構(gòu)和三級(jí)結(jié)構(gòu), 例如十字形(由反向重復(fù)序列導(dǎo)致)和Z字形的DNA序列的組件。這些非標(biāo)準(zhǔn)二級(jí)結(jié)構(gòu)和三級(jí)結(jié)構(gòu)在真核細(xì)胞中經(jīng)常出現(xiàn),而且這些結(jié)構(gòu)能夠阻礙真核細(xì)胞DNA 在傳統(tǒng)菌株中的克隆。sure感受態(tài)細(xì)胞是限制性?xún)?nèi)切酶陰性的(McrA-, McrCB-, McrF-, Mrr-, HsdR-),核酸內(nèi)切酶(endA)缺陷,和重組酶(recB recJ)缺陷的。同時(shí)sure感受態(tài)細(xì)胞中所具有的F′ 游離基因上面的lacIqZΔM15基因,使得能夠利用藍(lán)白斑進(jìn)行克隆篩選。SURE感受態(tài)細(xì)胞主要是用來(lái)克隆不穩(wěn)定DNA結(jié)構(gòu), 大腸桿菌DNA修復(fù)系統(tǒng)會(huì)針對(duì)重復(fù)序列、二級(jí)結(jié)構(gòu)(如Z-DNA)等真核DNA進(jìn)行重排或刪除修飾。SURE感受態(tài)細(xì)胞針對(duì)uvrC,umuC,SbcC 和RecJ等參與修飾的大腸桿菌基因或蛋白進(jìn)行突變,提高了真核來(lái)源、不規(guī)則DNA的穩(wěn)定性達(dá)20倍以上,并且適合克隆甲基化DNA。

本身具有Kana和Tet抗性。當(dāng)轉(zhuǎn)化氯霉素抗性質(zhì)粒到sure感受態(tài)細(xì)胞中時(shí),一定要用100 ug/ml的氯霉素平板去篩選。因?yàn)閟ure感受態(tài)細(xì)胞在40ug/ul的氯霉素條件下具有抗性,而對(duì)于100ug/ul的氯霉素抗生素具有敏感性。

sure感受態(tài)細(xì)胞可以用于藍(lán)白斑篩選,具有l(wèi)az互補(bǔ)基因。

在載體構(gòu)建過(guò)程中,我們經(jīng)常會(huì)遇到一些基因片段具有高度的重復(fù),這導(dǎo)致插入載體中的序列可能會(huì)在細(xì)菌擴(kuò)增中不穩(wěn)定,在質(zhì)粒擴(kuò)增中產(chǎn)生形成片段的缺失和重排,如發(fā)現(xiàn)插入片段高頻率地產(chǎn)生缺失和重排,可以嘗試使用重組缺陷大腸桿菌菌株,例如sure感受態(tài)細(xì)胞。