根據(jù)綠色熒光蛋白基因和枯草芽孢桿菌木糖誘導型啟動子PxylR序列, 分別設(shè)計兩對特異引物primers PxyF/R 和primers gfpF/R,擴增獲得了完整的啟動子PxylR和gfp基因序列。進一步以上述產(chǎn)物混合物為模板，以primer PxyF/ primer gfpR做引物進行重迭PCR,獲得了PxylR-gfp重組翻譯融合表達盒。經(jīng)Sph I和Kpn I完全酶切 后，將PxylR-gfp表達盒插入大腸桿菌-枯草芽孢桿菌穿梭載體pBR22，得到相應(yīng)的重組表達質(zhì)粒pGFP22