p3xFlag-CMV-14表達(dá)載體是一個(gè)6.3 kb的載體，從pCMV5載體衍生而來，用于在哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)瞬表達(dá)或穩(wěn)表達(dá)C末端帶有3xFlag標(biāo)簽的融合蛋白。載體多克隆位點(diǎn)下游片段編碼了三個(gè)相鄰Flag抗原表位（Asp-Tyr-Lys-Xaa-Xaa-Asp）。這使得能夠使用Flag M2抗體檢測蛋白表達(dá)情況。

載體上的人類巨細(xì)胞病毒(cytomegalovirus)啟動(dòng)子調(diào)控區(qū)域促進(jìn)了Flag融合蛋白基因的轉(zhuǎn)錄.氨基糖苷類磷酸轉(zhuǎn)移酶基因(Neo)使得載體具有耐氨基糖苷類例如為G418的能力,允許篩選轉(zhuǎn)染成功的細(xì)胞株。

pP3XFLAG-CMV-14表達(dá)載體是大腸桿菌和哺乳動(dòng)物細(xì)胞的穿梭載體。當(dāng)使用SV40 T抗原表達(dá)的宿主細(xì)胞系，如COS細(xì)胞，復(fù)制和基因組整合效率能夠達(dá)到最佳最佳狀態(tài)。

0001 CCATTCGCCA TTCAGGCTGC GCAACTGTTG GGAAGGGCGA TCGGTGCGGG CCTCTTCGCT 
0061 ATTACGCCAG CTGGCGAAAG GGGGATGTGC TGCAAGGCGA TTAAGTTGGG TAACGCCAGG 
0121 GTTTTCCCAG TCACGACGTT GTAAAACGAC GGCCAGTGCC AAGCTGATCT ATACATTGAA 
0181 TCAATATTGG CAATTAGCCA TATTAGTCAT TGGTTATATA GCATAAATCA ATATTGGCTA 
0241 TTGGCCATTG CATACGTTGT ATCTATATCA TAATATGTAC ATTTATATTG GCTCATGTCC 
0301 AATATGACCG CCATGTTGAC ATTGATTATT GACTAGTTAT TAATAGTAAT CAATTACGGG 
0361 GTCATTAGTT CATAGCCCAT ATATGGAGTT CCGCGTTACA TAACTTACGG TAAATGGCCC 
0421 GCCTGGCTGA CCGCCCAACG ACCCCCGCCC ATTGACGTCA ATAATGACGT ATGTTCCCAT 
0481 AGTAACGCCA ATAGGGACTT TCCATTGACG TCAATGGGTG GAGTATTTAC GGTAAACTGC 
0541 CCACTTGGCA GTACATCAAG TGTATCATAT GCCAAGTCCG CCCCCTATTG ACGTCAATGA 
0601 CGGTAAATGG CCCGCCTGGC ATTATGCCCA GTACATGACC TTACGGGACT TTCCTACTTG 
0661 GCAGTACATC TACGTATTAG TCATCGCTAT TACCATGGTG ATGCGGTTTT GGCAGTACAC 
0721 CAATGGGCGT GGATAGCGGT TTGACTCACG GGGATTTCCA AGTCTCCACC CCATTGACGT 
0781 CAATGGGAGT TTGTTTTGGC ACCAAAATCA ACGGGACTTT CCAAAATGTC GTAATAACCC 
0841 CGCCCCGTTG ACGCAAATGG GCGGTAGGCG TGTACGGTGG GAGGTCTATA TAAGCAGAGC 
0901 TCGTTTAGTG AACCGTCAGA ATTAAGCTTG CGGCCGCGAA TTCATCGATA GATCTGATAT 
0961 CGGTACCAGT CGACTCTAGA GGATCCCGGG CTGACTACAA AGACCATGAC GGTGATTATA 
1021 AAGATCATGA CATCGACTAC AAGGATGACG ATGACAAGTA GTGATCCCGG GTGGCATCCC 
1081 TGTGACCCCT CCCCAGTGCC TCTCCTGGCC CTGGAAGTTG CCACTCCAGT GCCCACCAGC 
1141 CTTGTCCTAA TAAAATTAAG TTGCATCATT TTGTCTGACT AGGTGTCCTT CTATAATATT 
1201 ATGGGGTGGA GGGGGGTGGT ATGGAGCAAG GGGCAAGTTG GGAAGACAAC CTGTAGGGCC 
1261 TGCGGGGTCT ATTGGGAACC AAGCTGGAGT GCAGTGGCAC AATCTTGGCT CACTGCAATC 
1321 TCCGCCTCCT GGGTTCAAGC GATTCTCCTG CCTCAGCCTC CCGAGTTGTT GGGATTCCAG 
1381 GCATGCATGA CCAGGCTCAG CTAATTTTTG TTTTTTTGGT AGAGACGGGG TTTCACCATA 
1441 TTGGCCAGGC TGGTCTCCAA CTCCTAATCT CAGGTGATCT ACCCACCTTG GCCTCCCAAA 
1501 TTGCTGGGAT TACAGGCGTG AACCACTGCT CCCTTCCCTG TCCTTCTGAT TTTAAAATAA 
1561 CTATACCAGC AGGAGGACGT CCAGACACAG CATAGGCTAC CTGGCCATGC CCAACCGGTG 
1621 GGACATTTGA GTTGCTTGCT TGGCACTGTC CTCTCATGCG TTGGGTCCAC TCAGTAGATG 
1681 CCTGTTGAAT TGGGTACGCG GCCAGCTTGG CTGTGGAATG TGTGTCAGTT AGGGTGTGGA 
1741 AAGTCCCCAG GCTCCCCAGC AGGCAGAAGT ATGCAAAGCA TGCATCTCAA TTAGTCAGCA 
1801 ACCAGGTGTG GAAAGTCCCC AGGCTCCCCA GCAGGCAGAA GTATGCAAAG CATGCATCTC 
1861 AATTAGTCAG CAACCATAGT CCCGCCCCTA ACTCCGCCCA TCCCGCCCCT AACTCCGCCC 
1921 AGTTCCGCCC ATTCTCCGCC CCATGGCTGA CTAATTTTTT TTATTTATGC AGAGGCCGAG 
1981 GCCGCCTCGG CCTCTGAGCT ATTCCAGAAG TAGTGAGGAG GCTTTTTTGG AGGAATTGAT 
2041 CAGCTTGGGA TCTGATCAAG AGACAGGATG AGGATCGTTT CGCATGATTG AACAAGATGG 
2101 ATTGCACGCA GGTTCTCCGG CCGCTTGGGT GGAGAGGCTA TTCGGCTATG ACTGGGCACA 
2161 ACAGACAATC GGCTGCTCTG ATGCCGCCGT GTTCCGGCTG TCAGCGCAGG GGCGCCCGGT 
2221 TCTTTTTGTC AAGACCGACC TGTCCGGTGC CCTGAATGAA CTGCAGGACG AGGCAGCGCG 
2281 GCTATCGTGG CTGGCCACGA CGGGCGTTCC TTGCGCAGCT GTGCTCGACG TTGTCACTGA 
2341 AGCGGGAAGG GACTGGCTGC TATTGGGCGA AGTGCCGGGG CAGGATCTCC TGTCATCTCA 
2401 CCTTGCTCCT GCCGAGAAAG TATCCATCAT GGCTGATGCA ATGCGGCGGC TGCATACGCT 
2461 TGATCCGGCT ACCTGCCCAT TCGACCACCA AGCGAAACAT CGCATCGAGC GAGCACGTAC 
2521 TCGGATGGAA GCCGGTCTTG TCGATCAGGA TGATCTGGAC GAAGAGCATC AGGGGCTCGC 
2581 GCCAGCCGAA CTGTTCGCCA GGCTCAAGGC GCGCATGCCC GACGGCGAGG ATCTCGTCGT 
2641 GACCCATGGC GATGCCTGCT TGCCGAATAT CATGGTGGAA AATGGCCGCT TTTCTGGATT 
2701 CATCGACTGT GGCCGGCTGG GTGTGGCGGA CCGCTATCAG GACATAGCGT TGGCTACCCG 
2761 TGATATTGCT GAAGAGCTTG GCGGCGAATG GGCTGACCGC TTCCTCGTGC TTTACGGTAT 
2821 CGCCGCTCCC GATTCGCAGC GCATCGCCTT CTATCGCCTT CTTGACGAGT TCTTCTGAGC 
2881 GGGACTCTGG GGTTCGAAAT GACCGACCAA GCGACGCCCA ACCTGCCATC ACGAGATTTC 
2941 GATTCCACCG CCGCCTTCTA TGAAAGGTTG GGCTTCGGAA TCGTTTTCCG GGACGCCGGC 
3001 TGGATGATCC TCCAGCGCGG GGATCTCATG CTGGAGTTCT TCGCCCACCC CGGGCTCGAT 
3061 CCCCTCGCGA GTTGGTTCAG CTGCTGCCTG AGGCTGGACG ACCTCGCGGA GTTCTACCGG 
3121 CAGTGCAAAT CCGTCGGCAT CCAGGAAACC AGCAGCGGCT ATCCGCGCAT CCATGCCCCC 
3181 GAACTGCAGG AGTGGGGAGG CACGATGGCC GCTTTGGTCG ACCCGGACGG GACGCTCCTG 
3241 CGCCTGATAC AGAACGAATT GCTTGCAGGC ATCTCATGAG TGTGTCTTCC CGTTTTCCGC 
3301 CTGAGGTCAC TGCGTGGATG GAGCGCTGGC GCCTGCTGCG CGACGGCGAG CTGCTCACCA 
3361 CCCACTCGCC AAGCTGGAAC CGTAAAAAGG CCGCGTTGCT GGCGTTTTTC CATAGGCTCC 
3421 GCCGATCATA ATCAGCCATA CCACATTTGT AGAGGTTTTA CTTGCTTTAA AAAACCTCCC 
3481 ACACCTCCCC CTGAACCTGA AACATAAAAT GAATGCAATT GTTGTTGTTA ACTTGTTTAT 
3541 TGCAGCTTAT AATGGTTACA AATAAAGCAA TAGCATCACA AATTTCACAA ATAAAGCATT 
3601 TTTTTCACTG CATTCTAGTT GTGGTTTGTC CAAACTCATC AATGTATCTT ATCATGTCTG 
3661 GATCAATTCC CTATAGTGAG TCGTATTAAA TTCGTAATCA TGTCATAGCT GTTTCCTGTG 
3721 TGAAATTGTT ATCCGCTCAC AATTCCACAC AACATACGAG CCGGAAGCAT AAAGTGTAAA 
3781 GCCTGGGGTG CCTAATGAGT GAGCTAACTC ACATTAATTG CGTTGCGCTC ACTGCCCGCT 
3841 TTCCAGTCGG GAAACCTGTC GTGCCAGCTG CATTAATGAA TCGGCCAACG CGCGGGGAGA 
3901 GGCGGTTTGC GTATTGGGCG CTCTTCCGCT TCCTCGCTCA CTGACTCGCT GCGCTCGGTC 
3961 GTTCGGCTGC GGCGAGCGGT ATCAGCTCAC TCAAAGGCGG TAATACGGTT ATCCACAGAA 
4021 TCAGGGGATA ACGCAGGAAA GAACATGTGA GCAAAAGGCC AGCAAAAGGC CAGGAACCGT 
4081 AAAAAGGCCG CGTTGCTGGC GTTTTTCCAT AGGCTCCGCC CCCCTGACGA GCATCACAAA 
4141 AATCGACGCT CAAGTCAGAG GTGGCGAAAC CCGACAGGAC TATAAAGATA CCAGGCGTTT 
4201 CCCCCTGGAA GCTCCCTCGT GCGCTCTCCT GTTCCGACCC TGCCGCTTAC CGGATACCTG 
4261 TCCGCCTTTC TCCCTTCGGG AAGCGTGGCG CTTTCTCATA GCTCACGCTG TAGGTATCTC 
4321 AGTTCGGTGT AGGTCGTTCG CTCCAAGCTG GGCTGTGTGC ACGAACCCCC CGTTCAGCCC 
4381 GACCGCTGCG CCTTATCCGG TAACTATCGT CTTGAGTCCA ACCCGGTAAG ACACGACTTA 
4441 TCGCCACTGG CAGCAGCCAC TGGTAACAGG ATTAGCAGAG CGAGGTATGT AGGCGGTGCT 
4501 ACAGAGTTCT TGAAGTGGTG GCCTAACTAC GGCTACACTA GAAGAACAGT ATTTGGTATC 
4561 TGCGCTCTGC TGAAGCCAGT TACCTTCGGA AAAAGAGTTG GTAGCTCTTG ATCCGGCAAA 
4621 CAAACCACCG CTGGTAGCGG TGGTTTTTTT GTTTGCAAGC AGCAGATTAC GCGCAGAAAA 
4681 AAAGGATCTC AAGAAGATCC TTTGATCTTT TCTACGGGGT CTGACGCTCA GTGGAACGAA 
4741 AACTCACGTT AAGGGATTTT GGTCATGAGA TTATCAAAAA GGATCTTCAC CTAGATCCTT 
4801 TTAAATTAAA AATGAAGTTT TAAATCAATC TAAAGTATAT ATGAGTAAAC TTGGTCTGAC 
4861 AGTTACCAAT GCTTAATCAG TGAGGCACCT ATCTCAGCGA TCTGTCTATT TCGTTCATCC 
4921 ATAGTTGCCT GACTCCCCGT CGTGTAGATA ACTACGATAC GGGAGGGCTT ACCATCTGGC 
4981 CCCAGTGCTG CAATGATACC GCGAGACCCA CGCTCACCGG CTCCAGATTT ATCAGCAATA 
5041 AACCAGCCAG CCGGAAGGGC CGAGCGCAGA AGTGGTCCTG CAACTTTATC CGCCTCCATC 
5101 CAGTCTATTA ATTGTTGCCG GGAAGCTAGA GTAAGTAGTT CGCCAGTTAA TAGTTTGCGC 
5161 AACGTTGTTG CCATTGCTAC AGGCATCGTG GTGTCACGCT CGTCGTTTGG TATGGCTTCA 
5221 TTCAGCTCCG GTTCCCAACG ATCAAGGCGA GTTACATGAT CCCCCATGTT GTGCAAAAAA 
5281 GCGGTTAGCT CCTTCGGTCC TCCGATCGTT GTCAGAAGTA AGTTGGCCGC AGTGTTATCA 
5341 CTCATGGTTA TGGCAGCACT GCATAATTCT CTTACTGTCA TGCCATCCGT AAGATGCTTT 
5401 TCTGTGACTG GTGAGTACTC AACCAAGTCA TTCTGAGAAT AGTGTATGCG GCGACCGAGT 
5461 TGCTCTTGCC CGGCGTCAAT ACGGGATAAT ACCGCGCCAC ATAGCAGAAC TTTAAAAGTG 
5521 CTCATCATTG GAAAACGTTC TTCGGGGCGA AAACTCTCAA GGATCTTACC GCTGTTGAGA 
5581 TCCAGTTCGA TGTAACCCAC TCGTGCACCC AACTGATCTT CAGCATCTTT TACTTTCACC 
5641 AGCGTTTCTG GGTGAGCAAA AACAGGAAGG CAAAATGCCG CAAAAAAGGG AATAAGGGCG 
5701 ACACGGAAAT GTTGAATACT CATACTCTTC CTTTTTCAAT ATTATTGAAG CATTTATCAG 
5761 GGTTATTGTC TCATGAGCGG ATACATATTT GAATGTATTT AGAAAAATAA ACAAATAGGG 
5821 GTTCCGCGCA CATTTCCCCG AAAAGTGCCA CCTGACGCGC CCTGTAGCGG CGCATTAAGC 
5881 GCGGCGGGTG TGGTGGTTAC GCGCAGCGTG ACCGCTACAC TTGCCAGCGC CCTAGCGCCC 
5941 GCTCCTTTCG CTTTCTTCCC TTCCTTTCTC GCCACGTTCG CCGGCTTTCC CCGTCAAGCT 
6001 CTAAATCGGG GGCTCCCTTT AGGGTTCCGA TTTAGTGCTT TACGGCACCT CGACCCCAAA 
6061 AAACTTGATT AGGGTGATGG TTCACGTAGT GGGCCATCGC CCTGATAGAC GGTTTTTCGC 
6121 CCTTTGACGT TGGAGTCCAC GTTCTTTAAT AGTGGACTCT TGTTCCAAAC TGGAACAACA 
6181 CTCAACCCTA TCTCGGTCTA TTCTTTTGAT TTATAAGGGA TTTTGCCGAT TTCGGCCTAT 
6241 TGGTTAAAAA ATGAGCTGAT TTAACAAAAA TTTAACGCGA ATTTTAACAA AATATTAACG 
6301 CTTACAATTT