pTrcHis載體是來由pBR322質(zhì)粒衍生而來的表達載體,設(shè)計用來在大腸桿菌中進行重組蛋白的高效表達和純化。

載體上的Trc啟動子和rrnB抗終止區(qū)使得高水平蛋白表達成為可能.Trc啟動子由Trp啟動子的-35區(qū)域和Lac啟動子的-10區(qū)域共同組成。pTrcHis載體同時包含有一個LacIq基因，該基因編碼了Lac啟動子的抑制蛋白。LacIq基因的存在使得宿主菌是LacIq+還是LacIq-都可以高效抑制插入基因的轉(zhuǎn)錄。

進行蛋白表達時，大腸桿菌需要生長到對數(shù)生長期，然后加入1mM IPTG，去除阻遏蛋白，誘導表達。載體上的迷你順反子結(jié)構(gòu)能夠增強插入基因的轉(zhuǎn)錄水平，從而高水平表達目的蛋白。DNA插入片段位于載體表達片段下游，在其上游有一個N-端融合表達多肽序列，該序列包含有ATG起始密碼子，6xHis標簽，T7噬菌體10號基因的翻譯增強子，X press抗原表位，腸激酶酶切識別位點。

0001 GTTTGACAGC TTATCATCGA CTGCACGGTG CACCAATGCT TCTGGCGTCA GGCAGCCATC 
0061 GGAAGCTGTG GTATGGCTGT GCAGGTCGTA AATCACTGCA TAATTCGTGT CGCTCAAGGC 
0121 GCACTCCCGT TCTGGATAAT GTTTTTTGCG CCGACATCAT AACGGTTCTG GCAAATATTC 
0181 TGAAATGAGC TGTTGACAAT TAATCATCCG GCTCGTATAA TGTGTGGAAT TGTGAGCGGA 
0241 TAACAATTTC ACACAGGAAA CAGCGCCGCT GAGAAAAAGC GAAGCGGCAC TGCTCTTTAA 
0301 CAATTTATCA GACAATCTGT GTGGGCACTC GACCGGAATT ATCGATTAAC TTTATTATTA 
0361 AAAATTAAAG AGGTATATAT TAATGTATCG ATTAAATAAG GAGGAATAAA CCATGGGGGG 
0421 TTCTCATCAT CATCATCATC ATGGTATGGC TAGCATGACT GGTGGACAGC AAATGGGTCG 
0481 GGATCTGTAC GACGATGACG ATAAGGATCG ATGGATCCGA CCTCGAGATC TGCAGATGGT 
0541 ACCATATGGG AATTCGAAGC TTGGCTGTTT TGGCGGATGA GAGAAGATTT TCAGCCTGAT 
0601 ACAGATTAAA TCAGAACGCA GAAGCGGTCT GATAAAACAG AATTTGCCTG GCGGCAGTAG 
0661 CGCGGTGGTC CCACCTGACC CCATGCCGAA CTCAGAAGTG AAACGCCGTA GCGCCGATGG 
0721 TAGTGTGGGG TCTCCCCATG CGAGAGTAGG GAACTGCCAG GCATCAAATA AAACGAAAGG 
0781 CTCAGTCGAA AGACTGGGCC TTTCGTTTTA TCTGTTGTTT GTCGGTGAAC GCTCTCCTGA 
0841 GTAGGACAAA TCCGCCGGGA GCGGATTTGA ACGTTGCGAA GCAACGGCCC GGAGGGTGGC 
0901 GGGCAGGACG CCCGCCATAA ACTGCCAGGC ATCAAATTAA GCAGAAGGCC ATCCTGACGG 
0961 ATGGCCTTTT TGCGTTTCTA CAAACTCTTT TTGTTTATTT TTCTAAATAC ATTCAAATAT 
1021 GTATCCGCTC ATGAGACAAT AACCCTGATA AATGCTTCAA TAATATTGAA AAAGGAAGAG 
1081 TATGAGTATT CAACATTTCC GTGTCGCCCT TATTCCCTTT TTTGCGGCAT TTTGCCTTCC 
1141 TGTTTTTGCT CACCCAGAAA CGCTGGTGAA AGTAAAAGAT GCTGAAGATC AGTTGGGTGC 
1201 ACGAGTGGGT TACATCGAAC TGGATCTCAA CAGCGGTAAG ATCCTTGAGA GTTTTCGCCC 
1261 CGAAGAACGT TTTCCAATGA TGAGCACTTT TAAAGTTCTG CTATGTGGCG CGGTATTATC 
1321 CCGTGTTGAC GCCGGGCAAG AGCAACTCGG TCGCCGCATA CACTATTCTC AGAATGACTT 
1381 GGTTGAGTAC TCACCAGTCA CAGAAAAGCA TCTTACGGAT GGCATGACAG TAAGAGAATT 
1441 ATGCAGTGCT GCCATAACCA TGAGTGATAA CACTGCGGCC AACTTACTTC TGACAACGAT 
1501 CGGAGGACCG AAGGAGCTAA CCGCTTTTTT GCACAACATG GGGGATCATG TAACTCGCCT 
1561 TGATCGTTGG GAACCGGAGC TGAATGAAGC CATACCAAAC GACGAGCGTG ACACCACGAT 
1621 GCCTGTAGCA ATGGCAACAA CGTTGCGCAA ACTATTAACT GGCGAACTAC TTACTCTAGC 
1681 TTCCCGGCAA CAATTAATAG ACTGGATGGA GGCGGATAAA GTTGCAGGAC CACTTCTGCG 
1741 CTCGGCCCTT CCGGCTGGCT GGTTTATTGC TGATAAATCT GGAGCCGGTG AGCGTGGGTC 
1801 TCGCGGTATC ATTGCAGCAC TGGGGCCAGA TGGTAAGCCC TCCCGTATCG TAGTTATCTA 
1861 CACGACGGGG AGTCAGGCAA CTATGGATGA ACGAAATAGA CAGATCGCTG AGATAGGTGC 
1921 CTCACTGATT AAGCATTGGT AACTGTCAGA CCAAGTTTAC TCATATATAC TTTAGATTGA 
1981 TTTAAAACTT CATTTTTAAT TTAAAAGGAT CTAGGTGAAG ATCCTTTTTG ATAATCTCAT 
2041 GACCAAAATC CCTTAACGTG AGTTTTCGTT CCACTGAGCG TCAGACCCCG TAGAAAAGAT 
2101 CAAAGGATCT TCTTGAGATC CTTTTTTTCT GCGCGTAATC TGCTGCTTGC AAACAAAAAA 
2161 ACCACCGCTA CCAGCGGTGG TTTGTTTGCC GGATCAAGAG CTACCAACTC TTTTTCCGAA 
2221 GGTAACTGGC TTCAGCAGAG CGCAGATACC AAATACTGTC CTTCTAGTGT AGCCGTAGTT 
2281 AGGCCACCAC TTCAAGAACT CTGTAGCACC GCCTACATAC CTCGCTCTGC TAATCCTGTT 
2341 ACCAGTGGCT GCTGCCAGTG GCGATAAGTC GTGTCTTACC GGGTTGGACT CAAGACGATA 
2401 GTTACCGGAT AAGGCGCAGC GGTCGGGCTG AACGGGGGGT TCGTGCACAC AGCCCAGCTT 
2461 GGAGCGAACG ACCTACACCG AACTGAGATA CCTACAGCGT GAGCTATGAG AAAGCGCCAC 
2521 GCTTCCCGAA GGGAGAAAGG CGGACAGGTA TCCGGTAAGC GGCAGGGTCG GAACAGGAGA 
2581 GCGCACGAGG GAGCTTCCAG GGGGAAACGC CTGGTATCTT TATAGTCCTG TCGGGTTTCG 
2641 CCACCTCTGA CTTGAGCGTC GATTTTTGTG ATGCTCGTCA GGGGGGCGGA GCCTATGGAA 
2701 AAACGCCAGC AACGCGGCCT TTTTACGGTT CCTGGCCTTT TGCTGGCCTT TTGCTCACAT 
2761 GTTCTTTCCT GCGTTATCCC CTGATTCTGT GGATAACCGT ATTACCGCCT TTGAGTGAGC 
2821 TGATACCGCT CGCCGCAGCC GAACGACCGA GCGCAGCGAG TCAGTGAGCG AGGAAGCGGA 
2881 AGAGCGCCTG ATGCGGTATT TTCTCCTTAC GCATCTGTGC GGTATTTCAC ACCGCATATG 
2941 GTGCACTCTC AGTACAATCT GCTCTGATGC CGCATAGTTA AGCCAGTATA CACTCCGCTA 
3001 TCGCTACGTG ACTGGGTCAT GGCTGCGCCC CGACACCCGC CAACACCCGC TGACGCGCCC 
3061 TGACGGGCTT GTCTGCTCCC GGCATCCGCT TACAGACAAG CTGTGACCGT CTCCGGGAGC 
3121 TGCATGTGTC AGAGGTTTTC ACCGTCATCA CCGAAACGCG CGAGGCAGCA GATCAATTCG 
3181 CGCGCGAAGG CGAAGCGGCA TGCATTTACG TTGACACCAT CGAATGGCGC AAAACCTTTC 
3241 GCGGTATGGC ATGATAGCGC CCGGAAGAGA GTCAATTCAG GGTGGTGAAT GTGAAACCAG 
3301 TAACGTTATA CGATGTCGCA GAGTATGCCG GTGTCTCTTA TCAGACCGTT TCCCGCGTGG 
3361 TGAACCAGGC CAGCCACGTT TCTGCGAAAA CGCGGGAAAA AGTGGAAGCG GCGATGGCGG 
3421 AGCTGAATTA CATTCCCAAC CGCGTGGCAC AACAACTGGC GGGCAAACAG TCGTTGCTGA 
3481 TTGGCGTTGC CACCTCCAGT CTGGCCCTGC ACGCGCCGTC GCAAATTGTC GCGGCGATTA 
3541 AATCTCGCGC CGATCAACTG GGTGCCAGCG TGGTGGTGTC GATGGTAGAA CGAAGCGGCG 
3601 TCGAAGCCTG TAAAGCGGCG GTGCACAATC TTCTCGCGCA ACGCGTCAGT GGGCTGATCA 
3661 TTAACTATCC GCTGGATGAC CAGGATGCCA TTGCTGTGGA AGCTGCCTGC ACTAATGTTC 
3721 CGGCGTTATT TCTTGATGTC TCTGACCAGA CACCCATCAA CAGTATTATT TTCTCCCATG 
3781 AAGACGGTAC GCGACTGGGC GTGGAGCATC TGGTCGCATT GGGTCACCAG CAAATCGCGC 
3841 TGTTAGCGGG CCCATTAAGT TCTGTCTCGG CGCGTCTGCG TCTGGCTGGC TGGCATAAAT 
3901 ATCTCACTCG CAATCAAATT CAGCCGATAG CGGAACGGGA AGGCGACTGG AGTGCCATGT 
3961 CCGGTTTTCA ACAAACCATG CAAATGCTGA ATGAGGGCAT CGTTCCCACT GCGATGCTGG 
4021 TTGCCAACGA TCAGATGGCG CTGGGCGCAA TGCGCGCCAT TACCGAGTCC GGGCTGCGCG 
4081 TTGGTGCGGA TATCTCGGTA GTGGGATACG ACGATACCGA AGACAGCTCA TGTTATATCC 
4141 CGCCGTCAAC CACCATCAAA CAGGATTTTC GCCTGCTGGG GCAAACCAGC GTGGACCGCT 
4201 TGCTGCAACT CTCTCAGGGC CAGGCGGTGA AGGGCAATCA GCTGTTGCCC GTCTCACTGG 
4261 TGAAAAGAAA AACCACCCTG GCGCCCAATA CGCAAACCGC CTCTCCCCGC GCGTTGGCCG 
4321 ATTCATTAAT GCAGCTGGCA CGACAGGTTT CCCGACTGGA AAGCGGGCAG TGAGCGCAAC 
4381 GCAATTAATG TGAGTTAGCG CGAATTGATC TG