pTrcHis載體是來由pBR322質(zhì)粒衍生而來的表達(dá)載體,設(shè)計用來在大腸桿菌中進(jìn)行重組蛋白的高效表達(dá)和純化。

載體上的Trc啟動子和rrnB抗終止區(qū)使得高水平蛋白表達(dá)成為可能.Trc啟動子由Trp啟動子的-35區(qū)域和Lac啟動子的-10區(qū)域共同組成。pTrcHis載體同時包含有一個LacIq基因，該基因編碼了Lac啟動子的抑制蛋白。LacIq基因的存在使得宿主菌是LacIq+還是LacIq-都可以高效抑制插入基因的轉(zhuǎn)錄。

進(jìn)行蛋白表達(dá)時，大腸桿菌需要生長到對數(shù)生長期，然后加入1mM IPTG，去除阻遏蛋白，誘導(dǎo)表達(dá)。載體上的迷你順反子結(jié)構(gòu)能夠增強(qiáng)插入基因的轉(zhuǎn)錄水平，從而高水平表達(dá)目的蛋白。DNA插入片段位于載體表達(dá)片段下游，在其上游有一個N-端融合表達(dá)多肽序列，該序列包含有ATG起始密碼子，6xHis標(biāo)簽，T7噬菌體10號基因的翻譯增強(qiáng)子，X press抗原表位，腸激酶酶切識別位點(diǎn)。

0001 GTTTGACAGC TTATCATCGA CTGCACGGTG CACCAATGCT TCTGGCGTCA GGCAGCCATC 
0061 GGAAGCTGTG GTATGGCTGT GCAGGTCGTA AATCACTGCA TAATTCGTGT CGCTCAAGGC 
0121 GCACTCCCGT TCTGGATAAT GTTTTTTGCG CCGACATCAT AACGGTTCTG GCAAATATTC 
0181 TGAAATGAGC TGTTGACAAT TAATCATCCG GCTCGTATAA TGTGTGGAAT TGTGAGCGGA 
0241 TAACAATTTC ACACAGGAAA CAGCGCCGCT GAGAAAAAGC GAAGCGGCAC TGCTCTTTAA 
0301 CAATTTATCA GACAATCTGT GTGGGCACTC GACCGGAATT ATCGATTAAC TTTATTATTA 
0361 AAAATTAAAG AGGTATATAT TAATGTATCG ATTAAATAAG GAGGAATAAA CCATGGGGGG 
0421 TTCTCATCAT CATCATCATC ATGGTATGGC TAGCATGACT GGTGGACAGC AAATGGGTCG 
0481 GGATCTGTAC GACGATGACG ATAAGGATCC GAGCTCGAGA TCTGCAGCTG GTACCATATG 
0541 GGAATTCGAA GCTTGGCTGT TTTGGCGGAT GAGAGAAGAT TTTCAGCCTG ATACAGATTA 
0601 AATCAGAACG CAGAAGCGGT CTGATAAAAC AGAATTTGCC TGGCGGCAGT AGCGCGGTGG 
0661 TCCCACCTGA CCCCATGCCG AACTCAGAAG TGAAACGCCG TAGCGCCGAT GGTAGTGTGG 
0721 GGTCTCCCCA TGCGAGAGTA GGGAACTGCC AGGCATCAAA TAAAACGAAA GGCTCAGTCG 
0781 AAAGACTGGG CCTTTCGTTT TATCTGTTGT TTGTCGGTGA ACGCTCTCCT GAGTAGGACA 
0841 AATCCGCCGG GAGCGGATTT GAACGTTGCG AAGCAACGGC CCGGAGGGTG GCGGGCAGGA 
0901 CGCCCGCCAT AAACTGCCAG GCATCAAATT AAGCAGAAGG CCATCCTGAC GGATGGCCTT 
0961 TTTGCGTTTC TACAAACTCT TTTTGTTTAT TTTTCTAAAT ACATTCAAAT ATGTATCCGC 
1021 TCATGAGACA ATAACCCTGA TAAATGCTTC AATAATATTG AAAAAGGAAG AGTATGAGTA 
1081 TTCAACATTT CCGTGTCGCC CTTATTCCCT TTTTTGCGGC ATTTTGCCTT CCTGTTTTTG 
1141 CTCACCCAGA AACGCTGGTG AAAGTAAAAG ATGCTGAAGA TCAGTTGGGT GCACGAGTGG 
1201 GTTACATCGA ACTGGATCTC AACAGCGGTA AGATCCTTGA GAGTTTTCGC CCCGAAGAAC 
1261 GTTTTCCAAT GATGAGCACT TTTAAAGTTC TGCTATGTGG CGCGGTATTA TCCCGTGTTG 
1321 ACGCCGGGCA AGAGCAACTC GGTCGCCGCA TACACTATTC TCAGAATGAC TTGGTTGAGT 
1381 ACTCACCAGT CACAGAAAAG CATCTTACGG ATGGCATGAC AGTAAGAGAA TTATGCAGTG 
1441 CTGCCATAAC CATGAGTGAT AACACTGCGG CCAACTTACT TCTGACAACG ATCGGAGGAC 
1501 CGAAGGAGCT AACCGCTTTT TTGCACAACA TGGGGGATCA TGTAACTCGC CTTGATCGTT 
1561 GGGAACCGGA GCTGAATGAA GCCATACCAA ACGACGAGCG TGACACCACG ATGCCTGTAG 
1621 CAATGGCAAC AACGTTGCGC AAACTATTAA CTGGCGAACT ACTTACTCTA GCTTCCCGGC 
1681 AACAATTAAT AGACTGGATG GAGGCGGATA AAGTTGCAGG ACCACTTCTG CGCTCGGCCC 
1741 TTCCGGCTGG CTGGTTTATT GCTGATAAAT CTGGAGCCGG TGAGCGTGGG TCTCGCGGTA 
1801 TCATTGCAGC ACTGGGGCCA GATGGTAAGC CCTCCCGTAT CGTAGTTATC TACACGACGG 
1861 GGAGTCAGGC AACTATGGAT GAACGAAATA GACAGATCGC TGAGATAGGT GCCTCACTGA 
1921 TTAAGCATTG GTAACTGTCA GACCAAGTTT ACTCATATAT ACTTTAGATT GATTTAAAAC 
1981 TTCATTTTTA ATTTAAAAGG ATCTAGGTGA AGATCCTTTT TGATAATCTC ATGACCAAAA 
2041 TCCCTTAACG TGAGTTTTCG TTCCACTGAG CGTCAGACCC CGTAGAAAAG ATCAAAGGAT 
2101 CTTCTTGAGA TCCTTTTTTT CTGCGCGTAA TCTGCTGCTT GCAAACAAAA AAACCACCGC 
2161 TACCAGCGGT GGTTTGTTTG CCGGATCAAG AGCTACCAAC TCTTTTTCCG AAGGTAACTG 
2221 GCTTCAGCAG AGCGCAGATA CCAAATACTG TCCTTCTAGT GTAGCCGTAG TTAGGCCACC 
2281 ACTTCAAGAA CTCTGTAGCA CCGCCTACAT ACCTCGCTCT GCTAATCCTG TTACCAGTGG 
2341 CTGCTGCCAG TGGCGATAAG TCGTGTCTTA CCGGGTTGGA CTCAAGACGA TAGTTACCGG 
2401 ATAAGGCGCA GCGGTCGGGC TGAACGGGGG GTTCGTGCAC ACAGCCCAGC TTGGAGCGAA 
2461 CGACCTACAC CGAACTGAGA TACCTACAGC GTGAGCTATG AGAAAGCGCC ACGCTTCCCG 
2521 AAGGGAGAAA GGCGGACAGG TATCCGGTAA GCGGCAGGGT CGGAACAGGA GAGCGCACGA 
2581 GGGAGCTTCC AGGGGGAAAC GCCTGGTATC TTTATAGTCC TGTCGGGTTT CGCCACCTCT 
2641 GACTTGAGCG TCGATTTTTG TGATGCTCGT CAGGGGGGCG GAGCCTATGG AAAAACGCCA 
2701 GCAACGCGGC CTTTTTACGG TTCCTGGCCT TTTGCTGGCC TTTTGCTCAC ATGTTCTTTC 
2761 CTGCGTTATC CCCTGATTCT GTGGATAACC GTATTACCGC CTTTGAGTGA GCTGATACCG 
2821 CTCGCCGCAG CCGAACGACC GAGCGCAGCG AGTCAGTGAG CGAGGAAGCG GAAGAGCGCC 
2881 TGATGCGGTA TTTTCTCCTT ACGCATCTGT GCGGTATTTC ACACCGCATA TGGTGCACTC 
2941 TCAGTACAAT CTGCTCTGAT GCCGCATAGT TAAGCCAGTA TACACTCCGC TATCGCTACG 
3001 TGACTGGGTC ATGGCTGCGC CCCGACACCC GCCAACACCC GCTGACGCGC CCTGACGGGC 
3061 TTGTCTGCTC CCGGCATCCG CTTACAGACA AGCTGTGACC GTCTCCGGGA GCTGCATGTG 
3121 TCAGAGGTTT TCACCGTCAT CACCGAAACG CGCGAGGCAG CAGATCAATT CGCGCGCGAA 
3181 GGCGAAGCGG CATGCATTTA CGTTGACACC ATCGAATGGC GCAAAACCTT TCGCGGTATG 
3241 GCATGATAGC GCCCGGAAGA GAGTCAATTC AGGGTGGTGA ATGTGAAACC AGTAACGTTA 
3301 TACGATGTCG CAGAGTATGC CGGTGTCTCT TATCAGACCG TTTCCCGCGT GGTGAACCAG 
3361 GCCAGCCACG TTTCTGCGAA AACGCGGGAA AAAGTGGAAG CGGCGATGGC GGAGCTGAAT 
3421 TACATTCCCA ACCGCGTGGC ACAACAACTG GCGGGCAAAC AGTCGTTGCT GATTGGCGTT 
3481 GCCACCTCCA GTCTGGCCCT GCACGCGCCG TCGCAAATTG TCGCGGCGAT TAAATCTCGC 
3541 GCCGATCAAC TGGGTGCCAG CGTGGTGGTG TCGATGGTAG AACGAAGCGG CGTCGAAGCC 
3601 TGTAAAGCGG CGGTGCACAA TCTTCTCGCG CAACGCGTCA GTGGGCTGAT CATTAACTAT 
3661 CCGCTGGATG ACCAGGATGC CATTGCTGTG GAAGCTGCCT GCACTAATGT TCCGGCGTTA 
3721 TTTCTTGATG TCTCTGACCA GACACCCATC AACAGTATTA TTTTCTCCCA TGAAGACGGT 
3781 ACGCGACTGG GCGTGGAGCA TCTGGTCGCA TTGGGTCACC AGCAAATCGC GCTGTTAGCG 
3841 GGCCCATTAA GTTCTGTCTC GGCGCGTCTG CGTCTGGCTG GCTGGCATAA ATATCTCACT 
3901 CGCAATCAAA TTCAGCCGAT AGCGGAACGG GAAGGCGACT GGAGTGCCAT GTCCGGTTTT 
3961 CAACAAACCA TGCAAATGCT GAATGAGGGC ATCGTTCCCA CTGCGATGCT GGTTGCCAAC 
4021 GATCAGATGG CGCTGGGCGC AATGCGCGCC ATTACCGAGT CCGGGCTGCG CGTTGGTGCG 
4081 GATATCTCGG TAGTGGGATA CGACGATACC GAAGACAGCT CATGTTATAT CCCGCCGTCA 
4141 ACCACCATCA AACAGGATTT TCGCCTGCTG GGGCAAACCA GCGTGGACCG CTTGCTGCAA 
4201 CTCTCTCAGG GCCAGGCGGT GAAGGGCAAT CAGCTGTTGC CCGTCTCACT GGTGAAAAGA 
4261 AAAACCACCC TGGCGCCCAA TACGCAAACC GCCTCTCCCC GCGCGTTGGC CGATTCATTA 
4321 ATGCAGCTGG CACGACAGGT TTCCCGACTG GAAAGCGGGC AGTGAGCGCA ACGCAATTAA 
4381 TGTGAGTTAG CGCGAATTGA TCTG