pTrcHis載體是來由pBR322質(zhì)粒衍生而來的表達(dá)載體,設(shè)計(jì)用來在大腸桿菌中進(jìn)行重組蛋白的高效表達(dá)和純化。

載體上的Trc啟動(dòng)子和rrnB抗終止區(qū)使得高水平蛋白表達(dá)成為可能.Trc啟動(dòng)子由Trp啟動(dòng)子的-35區(qū)域和Lac啟動(dòng)子的-10區(qū)域共同組成。pTrcHis載體同時(shí)包含有一個(gè)LacIq基因，該基因編碼了Lac啟動(dòng)子的抑制蛋白。LacIq基因的存在使得宿主菌是LacIq+還是LacIq-都可以高效抑制插入基因的轉(zhuǎn)錄。

進(jìn)行蛋白表達(dá)時(shí)，大腸桿菌需要生長到對數(shù)生長期，然后加入1mM IPTG，去除阻遏蛋白，誘導(dǎo)表達(dá)。載體上的迷你順反子結(jié)構(gòu)能夠增強(qiáng)插入基因的轉(zhuǎn)錄水平，從而高水平表達(dá)目的蛋白。DNA插入片段位于載體表達(dá)片段下游，在其上游有一個(gè)N-端融合表達(dá)多肽序列，該序列包含有ATG起始密碼子，6xHis標(biāo)簽，T7噬菌體10號基因的翻譯增強(qiáng)子，X press抗原表位，腸激酶酶切識別位點(diǎn)。

0001 GTTTGACAGC TTATCATCGA CTGCACGGTG CACCAATGCT TCTGGCGTCA GGCAGCCATC 
0061 GGAAGCTGTG GTATGGCTGT GCAGGTCGTA AATCACTGCA TAATTCGTGT CGCTCAAGGC 
0121 GCACTCCCGT TCTGGATAAT GTTTTTTGCG CCGACATCAT AACGGTTCTG GCAAATATTC 
0181 TGAAATGAGC TGTTGACAAT TAATCATCCG GCTCGTATAA TGTGTGGAAT TGTGAGCGGA 
0241 TAACAATTTC ACACAGGAAA CAGCGCCGCT GAGAAAAAGC GAAGCGGCAC TGCTCTTTAA 
0301 CAATTTATCA GACAATCTGT GTGGGCACTC GACCGGAATT ATCGATTAAC TTTATTATTA 
0361 AAAATTAAAG AGGTATATAT TAATGTATCG ATTAAATAAG GAGGAATAAA CCATGGGGGG 
0421 TTCTCATCAT CATCATCATC ATGGTATGGC TAGCATGACT GGTGGACAGC AAATGGGTCG 
0481 GGATCTGTAC GACGATGACG ATAAGGATCG ATGGGGATCC GAGCTCGAGA TCTGCAGCTG 
0541 GTACCATATG GGAATTCGAA GCTTGGCTGT TTTGGCGGAT GAGAGAAGAT TTTCAGCCTG 
0601 ATACAGATTA AATCAGAACG CAGAAGCGGT CTGATAAAAC AGAATTTGCC TGGCGGCAGT 
0661 AGCGCGGTGG TCCCACCTGA CCCCATGCCG AACTCAGAAG TGAAACGCCG TAGCGCCGAT 
0721 GGTAGTGTGG GGTCTCCCCA TGCGAGAGTA GGGAACTGCC AGGCATCAAA TAAAACGAAA 
0781 GGCTCAGTCG AAAGACTGGG CCTTTCGTTT TATCTGTTGT TTGTCGGTGA ACGCTCTCCT 
0841 GAGTAGGACA AATCCGCCGG GAGCGGATTT GAACGTTGCG AAGCAACGGC CCGGAGGGTG 
0901 GCGGGCAGGA CGCCCGCCAT AAACTGCCAG GCATCAAATT AAGCAGAAGG CCATCCTGAC 
0961 GGATGGCCTT TTTGCGTTTC TACAAACTCT TTTTGTTTAT TTTTCTAAAT ACATTCAAAT 
1021 ATGTATCCGC TCATGAGACA ATAACCCTGA TAAATGCTTC AATAATATTG AAAAAGGAAG 
1081 AGTATGAGTA TTCAACATTT CCGTGTCGCC CTTATTCCCT TTTTTGCGGC ATTTTGCCTT 
1141 CCTGTTTTTG CTCACCCAGA AACGCTGGTG AAAGTAAAAG ATGCTGAAGA TCAGTTGGGT 
1201 GCACGAGTGG GTTACATCGA ACTGGATCTC AACAGCGGTA AGATCCTTGA GAGTTTTCGC 
1261 CCCGAAGAAC GTTTTCCAAT GATGAGCACT TTTAAAGTTC TGCTATGTGG CGCGGTATTA 
1321 TCCCGTGTTG ACGCCGGGCA AGAGCAACTC GGTCGCCGCA TACACTATTC TCAGAATGAC 
1381 TTGGTTGAGT ACTCACCAGT CACAGAAAAG CATCTTACGG ATGGCATGAC AGTAAGAGAA 
1441 TTATGCAGTG CTGCCATAAC CATGAGTGAT AACACTGCGG CCAACTTACT TCTGACAACG 
1501 ATCGGAGGAC CGAAGGAGCT AACCGCTTTT TTGCACAACA TGGGGGATCA TGTAACTCGC 
1561 CTTGATCGTT GGGAACCGGA GCTGAATGAA GCCATACCAA ACGACGAGCG TGACACCACG 
1621 ATGCCTGTAG CAATGGCAAC AACGTTGCGC AAACTATTAA CTGGCGAACT ACTTACTCTA 
1681 GCTTCCCGGC AACAATTAAT AGACTGGATG GAGGCGGATA AAGTTGCAGG ACCACTTCTG 
1741 CGCTCGGCCC TTCCGGCTGG CTGGTTTATT GCTGATAAAT CTGGAGCCGG TGAGCGTGGG 
1801 TCTCGCGGTA TCATTGCAGC ACTGGGGCCA GATGGTAAGC CCTCCCGTAT CGTAGTTATC 
1861 TACACGACGG GGAGTCAGGC AACTATGGAT GAACGAAATA GACAGATCGC TGAGATAGGT 
1921 GCCTCACTGA TTAAGCATTG GTAACTGTCA GACCAAGTTT ACTCATATAT ACTTTAGATT 
1981 GATTTAAAAC TTCATTTTTA ATTTAAAAGG ATCTAGGTGA AGATCCTTTT TGATAATCTC 
2041 ATGACCAAAA TCCCTTAACG TGAGTTTTCG TTCCACTGAG CGTCAGACCC CGTAGAAAAG 
2101 ATCAAAGGAT CTTCTTGAGA TCCTTTTTTT CTGCGCGTAA TCTGCTGCTT GCAAACAAAA 
2161 AAACCACCGC TACCAGCGGT GGTTTGTTTG CCGGATCAAG AGCTACCAAC TCTTTTTCCG 
2221 AAGGTAACTG GCTTCAGCAG AGCGCAGATA CCAAATACTG TCCTTCTAGT GTAGCCGTAG 
2281 TTAGGCCACC ACTTCAAGAA CTCTGTAGCA CCGCCTACAT ACCTCGCTCT GCTAATCCTG 
2341 TTACCAGTGG CTGCTGCCAG TGGCGATAAG TCGTGTCTTA CCGGGTTGGA CTCAAGACGA 
2401 TAGTTACCGG ATAAGGCGCA GCGGTCGGGC TGAACGGGGG GTTCGTGCAC ACAGCCCAGC 
2461 TTGGAGCGAA CGACCTACAC CGAACTGAGA TACCTACAGC GTGAGCTATG AGAAAGCGCC 
2521 ACGCTTCCCG AAGGGAGAAA GGCGGACAGG TATCCGGTAA GCGGCAGGGT CGGAACAGGA 
2581 GAGCGCACGA GGGAGCTTCC AGGGGGAAAC GCCTGGTATC TTTATAGTCC TGTCGGGTTT 
2641 CGCCACCTCT GACTTGAGCG TCGATTTTTG TGATGCTCGT CAGGGGGGCG GAGCCTATGG 
2701 AAAAACGCCA GCAACGCGGC CTTTTTACGG TTCCTGGCCT TTTGCTGGCC TTTTGCTCAC 
2761 ATGTTCTTTC CTGCGTTATC CCCTGATTCT GTGGATAACC GTATTACCGC CTTTGAGTGA 
2821 GCTGATACCG CTCGCCGCAG CCGAACGACC GAGCGCAGCG AGTCAGTGAG CGAGGAAGCG 
2881 GAAGAGCGCC TGATGCGGTA TTTTCTCCTT ACGCATCTGT GCGGTATTTC ACACCGCATA 
2941 TGGTGCACTC TCAGTACAAT CTGCTCTGAT GCCGCATAGT TAAGCCAGTA TACACTCCGC 
3001 TATCGCTACG TGACTGGGTC ATGGCTGCGC CCCGACACCC GCCAACACCC GCTGACGCGC 
3061 CCTGACGGGC TTGTCTGCTC CCGGCATCCG CTTACAGACA AGCTGTGACC GTCTCCGGGA 
3121 GCTGCATGTG TCAGAGGTTT TCACCGTCAT CACCGAAACG CGCGAGGCAG CAGATCAATT 
3181 CGCGCGCGAA GGCGAAGCGG CATGCATTTA CGTTGACACC ATCGAATGGC GCAAAACCTT 
3241 TCGCGGTATG GCATGATAGC GCCCGGAAGA GAGTCAATTC AGGGTGGTGA ATGTGAAACC 
3301 AGTAACGTTA TACGATGTCG CAGAGTATGC CGGTGTCTCT TATCAGACCG TTTCCCGCGT 
3361 GGTGAACCAG GCCAGCCACG TTTCTGCGAA AACGCGGGAA AAAGTGGAAG CGGCGATGGC 
3421 GGAGCTGAAT TACATTCCCA ACCGCGTGGC ACAACAACTG GCGGGCAAAC AGTCGTTGCT 
3481 GATTGGCGTT GCCACCTCCA GTCTGGCCCT GCACGCGCCG TCGCAAATTG TCGCGGCGAT 
3541 TAAATCTCGC GCCGATCAAC TGGGTGCCAG CGTGGTGGTG TCGATGGTAG AACGAAGCGG 
3601 CGTCGAAGCC TGTAAAGCGG CGGTGCACAA TCTTCTCGCG CAACGCGTCA GTGGGCTGAT 
3661 CATTAACTAT CCGCTGGATG ACCAGGATGC CATTGCTGTG GAAGCTGCCT GCACTAATGT 
3721 TCCGGCGTTA TTTCTTGATG TCTCTGACCA GACACCCATC AACAGTATTA TTTTCTCCCA 
3781 TGAAGACGGT ACGCGACTGG GCGTGGAGCA TCTGGTCGCA TTGGGTCACC AGCAAATCGC 
3841 GCTGTTAGCG GGCCCATTAA GTTCTGTCTC GGCGCGTCTG CGTCTGGCTG GCTGGCATAA 
3901 ATATCTCACT CGCAATCAAA TTCAGCCGAT AGCGGAACGG GAAGGCGACT GGAGTGCCAT 
3961 GTCCGGTTTT CAACAAACCA TGCAAATGCT GAATGAGGGC ATCGTTCCCA CTGCGATGCT 
4021 GGTTGCCAAC GATCAGATGG CGCTGGGCGC AATGCGCGCC ATTACCGAGT CCGGGCTGCG 
4081 CGTTGGTGCG GATATCTCGG TAGTGGGATA CGACGATACC GAAGACAGCT CATGTTATAT 
4141 CCCGCCGTCA ACCACCATCA AACAGGATTT TCGCCTGCTG GGGCAAACCA GCGTGGACCG 
4201 CTTGCTGCAA CTCTCTCAGG GCCAGGCGGT GAAGGGCAAT CAGCTGTTGC CCGTCTCACT 
4261 GGTGAAAAGA AAAACCACCC TGGCGCCCAA TACGCAAACC GCCTCTCCCC GCGCGTTGGC 
4321 CGATTCATTA ATGCAGCTGG CACGACAGGT TTCCCGACTG GAAAGCGGGC AGTGAGCGCA 
4381 ACGCAATTAA TGTGAGTTAG CGCGAATTGA TCTG